Genetikos skonis: MiniLab su elektroforezės reagentais, TAE
Genetikos skonis: elektroforezės MiniLab TAE MiniOne M6010TAE - visapusiškas ir giliausias biologijos laboratorinis rinkinys, apimantis tris didžiąsias AP biologijos idėjas viename komplekte. Mokiniai ištiria TAS2R38 geną - vieną iš geriausiai ištirtų žmogaus genų - atlikdami savo DNR išskyrimą, PGR amplifikaciją, restrikcinio fermento HaeIII analizę ir gelio elektroforezę. Rinkinys apima genetinę analizę, bioinformatiką, populiacijų genetiką ir evoliuciją.
Pirmiausia mokiniai nustato savo fenotipą ragaudami PTC popierių - ar jie jautėjai, ar nejautėjai kartumo. Tada išskiria savą DNR iš žandų ląstelių, amplifikuoja 221 bp TAS2R38 geno regioną su PGR, pjausto HaeIII restrikciniu fermentu (jautėjų alelis pjaustomas į 176 bp ir 45 bp fragmentus, nejautėjų - ne) ir vizualizuoja rezultatus elektroforeze. Paskutiniame etape mokiniai lygina savo genotipą su fenotipu ir nagrinėja PTC pojūčio dažnį žmonių populiacijoje.
Ugdomos sąvokos ir laboratoriniai įgūdžiai:
- TAS2R38 geno struktūra ir SNP (vieno nukleotido polimorfizmas)
- DNR išskyrimas iš žandų ląstelių
- PGR amplifikacija specifiniam geno regionui
- Restrikcinio fermento HaeIII pjūvis ir DNR fragmentų analizė
- Genotipo ir fenotipo ryšys
- Populiacijų genetika ir PTC pojūčio dažnio analizė
- Bioinformatika ir evoliucija (AP pratęsimo veiklos)
Komplekto sudėtis (40 mokinių, 10 darbo vietų, 4 mokiniai kiekvienoje):
- DNR išskyrimo tirpalas
- Praimeriniai rinkiniai TAS2R38 genui
- FastTaq Master Mix (2X)
- HaeIII restrikcinis fermentas su skiedimo buferu
- MiniOne 5X mėginių krovimo dažiklis
- MiniOne DNR žymeklis
- 0,2 ml plonasieniukai PCR mėgintuvėliai
- 0,65 ml mikrocentrifugos mėgintuvėliai
- 40 vnt. PTC skonio popierių ir kontrolės popierių
- 10 puodelių 2% GreenGel agarozės
- 100 ml TAE buferinio tirpalo koncentrato
- 2 g valgomosios druskos
- Mokytojo vadovas
- Mokinio vadovas
Pastaba: reikalingas MiniOne PGR sistema ir centrifuga min. 8000 RPM (tiekiami atskirai). Laikoma 4°C, stabilu 3 mėnesius.
Pagrindinės savybės:
- Trys AP biologijos didžiosios idėjos viename rinkinyje
- Asmeninė patirtis - mokiniai tiria savo pačių DNR
- Trijų pamokų laboratorija (3 × 50 min.)
- HaeIII restriktinis fermentas - SNP identifikavimas
- TAE buferio versija
- Tinka 9–12 klasių ir AP biologijos mokiniams
- Gamintojas: MiniOne Systems, JAV